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Como sequenciamos o DNA? De Sanger ao NGS (Next Generation Sequencing)

#Sanger #MinION #PacBio #Illumina Na aula de hoje iremos descobrir como o sequenciamento de DNA é realizado! 00:43 Por que sequenciar genomas? 01:51 Prêmio Nobel em Química de 1980 01:52 Estrutura dos nucleotídeos e a importância para a síntese 05:25 Dogma Central: sequenciamos DNA, que pode vir do RNA 06:07 Sanger: Bases do método 07:34 Sanger: Passo-a-passo 12:04 Eletroforese de ácidos nucleicos 15:50 Sanger: Separação dos fragmentos e leitura 20:29 Sanger: nucleotídeos fluorescentes 25:36 Sanger: e se eu tiver duas sequências diferentes na mesma amostra? 27:33 Sanger: Limitações 29:14 Lei de Moore e o sequenciamento de DNA: um breakthrough 31:29 Linha do tempo do sequenciamento de DNA 34:25 Comparação entre principais técnicas 36:31 Por que eu não preciso clonar (isolar) os fragmentos para o sequenciamento de nova geração? 37:36 Illumina: panorama geral da técnica 44:18 Illumina: Geração dos clusters 47:05 Illumina: Sequencing by Synthesis 50:54 PacBio SMRT: Visão Geral 52:54 PacBio SMRT: Zero-mode wave guide 53:43 PacBio SMRT: Preparo da biblioteca 55:25 PacBio SMRT: Sequenciamento propriamente dito 57:07 PacBio SMRT: Modos de leitura 57:46 Nanopore MinION 01:00:06 Nanopore MinION: Uma analogia para facilitar 01:03:05 Nanopore MinION: Bons estudos!